Цілеспрямований та оптимістичний Маріо з дитинства нерозлучний зі своїм молодшим братом, боязким і сором'язливим Луїджі, якого завжди захищав від хуліганів. Обидва йдуть від свого роботодавця, щоб відкрити власний сантехнічний бізнес у Брукліні, витративши всі заощадження на рекламний ролик. Одного разу Маріо та Луїджі спускаються в підземні комунікації, щоб полагодити водопровід, де несподівано потрапляють через таємничу трубу до фантастичного Грибного королівства і втягуються у неймовірні пригоди з порятунку принцеси Піч від злобного Боузера...